副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）是猪的重要条件致病菌，也是实验动物设施中不容忽视的跨界感染病原。每年春季因环境温差大、仔猪断奶应激集中，成为副猪嗜血杆菌的高发期，该菌为猪呼吸道的常在菌，但当机体在应激、免疫功能受抑或存在原发感染等特定条件下，细菌可侵入体内引起以多发性浆膜炎、关节炎、败血症等为特征的革拉斯氏病（Glässer disease），该病常继发于蓝耳病、圆环病毒病、流感等疫病之后，与其他呼吸道病原体混合感染，给规模化猪场及实验猪养殖带来重大的经济损失。该菌不仅可引发实验用猪、小型猪患疾病，还会污染实验体系、干扰动物模型构建、导致实验动物被淘汰。

本文从病原特性与流行病学背景、易感实验动物、致病性表现、对动物实验的干扰、诊断与处置、生物安全控制等方面，系统阐述副猪嗜血杆菌对实验动物的影响，为实验动物中心，兽医病理、感染与免疫研究提供参考。

PART 01病原与流行病学背景

副猪嗜血杆菌属于巴氏杆菌科，为革兰氏阴性小杆菌，该菌具有运动性和多样性，其生长需要凝血因子V（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD），其核心特征与流行特点如下：

1、血清型与毒力特征：血清型复杂，目前已鉴定出至少15种血清型，另有20%以上的分离株无法定型。这些血清型不具有交叉免疫性，不同血清型菌株导致的临床症状、致病性及宿主免疫反应差异显著，其中血清1、5、10、12、13、14型毒力最强，与高死亡率相关；血清2、4、8、15型毒力次之，通常引发浆膜炎、关节炎等；血清3、6、7、9、11型毒力较弱，常与无症状感染相关（见表1）。同时，HPS具有明显的地方性特征，同一血清型的不同地区的分离株，毒力也可能存在差异。为了解中国副猪嗜血杆菌的流行情况，有学者在全国各地送检的病料中分离出281株HPS，经琼扩试验和间接血凝试验对血清分型发现，我国主要以血清4型（24.2%）和5型（19.2%）为主要流行血清型，其次为13型（12.5%）、14型（7.1%）、12型（6.8%），血清1、2、6、7、9、10、11和15型仅有少量菌株检出，另有12.1%的菌株不能分型。

表1 不同HPS血清型菌株对SPF猪的毒力

资料来源：Rapp-Gabrielson和Gabrielson,1992。a：按猪腹腔内接种5×108菌落形成单位（CFU）计算其毒力。

2、传播途径：主要通过呼吸道飞沫、直接接触、污染环境等水平传播，亦可经消化道、污染实验器械传播，还可通过胎盘、产道等途径发生垂直传播。机体应激与免疫抑制会显著提升该菌的传播效率与发病率。

PART 02易感实验动物

HPS只感染猪，在实验动物中，该菌主要威胁实验用小型猪、SPF猪及屏障环境外引种的猪，易感群体为2～4月龄的猪，4～8周龄仔猪为高发群体，发病率一般为10%～15%，严重时死亡率可达50%。SPF级猪群因无特异性母源抗体、机体免疫力相对单一，感染后易出现高发病率与高死亡率；无母源抗体的普通猪群接触病原后，可呈暴发性流行。若不同等级的猪混合饲养，还可能造成交叉污染，进而干扰实验。

小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等其他实验动物，在自然条件下一般不会感染副猪嗜血杆菌，仅在人工攻毒的实验模型中可出现细菌短暂定植、局部炎症反应或死亡，但该菌在这类动物体内不具备自然流行与持续传播的能力。

PART 03致病性表现

HPS的临床症状与感染的HPS毒株、病猪体内炎性损伤的部位密切相关，在我国存在HPS强毒力株和中等毒力株，但多数动物症状比较温和，这可能跟不同地区感染的HPS株型有关。在饲养管理水平高、机体高度健康的猪群中，该菌感染后发病急骤，猪只接触病原后数日内即可出现临床症状，根据发病类型与表现，主要分为以下三类：

1、急性败血症型（致死性最强）：绝大多数是由HPS强毒力株引起，病猪突发高热，精神沉郁，呼吸困难；皮肤发绀，末梢循环障碍；病情进展迅速，常在感染后24～48 h内急性死亡。剖检可见全身浆膜出血，肺组织充血、水肿，全身淋巴结肿大、充血。急性感染即使痊愈后也会有后遗症，母猪表现为易流产，公猪则表现为慢性跛行；即便对感染母猪使用抗生素治疗，其分娩过程中仍可能诱发严重的疾病。

2、典型多发性浆膜炎与关节炎型（特征性病变）：多由HPS中等毒力株引起，病猪心包膜增厚，有大量纤维素性渗出物附着，形成特征性的“绒毛心”；胸腔、腹腔内积聚大量纤维素性渗出液，导致脏器发生粘连；关节腔积液、滑膜肿胀，病猪表现为关节肿大、跛行，严重时丧失运动能力；若病菌侵入中枢神经系统则引发脑膜炎，病猪会出现共济失调、肢体抽搐、角弓反张等神经症状。

3、慢性感染与亚临床感染型：病猪表现为生长迟缓、体重持续下降、饲料利用率低；机体处于持续的免疫激活状态，炎症因子水平异常升高；亚临床感染猪外观无明显临床症状，但可成为隐性带菌者，持续向环境中排毒，造成养殖与实验环境的污染。

PART 04对动物实验的影响

HPS感染会从多个维度干扰动物实验的开展，导致实验数据失真、实验结果不可重复，具体影响如下：

1、生理生化指标紊乱：发病猪的外周血白细胞数量显著升高，急性期反应蛋白水平大幅上升，肝肾功能相关指标出现异常，凝血功能、电解质平衡及血气分析结果均偏离正常范围，直接导致实验动物的基础生理数据失去参考价值。

2、免疫功能严重干扰：发病猪的天然免疫与适应性免疫均被强烈激活，引发IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子风暴，使机体处于持续的炎症状态。此类生理变化会对疫苗免疫效果评价、免疫抑制剂研发、抗炎药物筛选等相关研究造成严重的背景干扰，导致实验结论出现偏差。

3、与人工构建动物模型相混淆：发病猪出现的自发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎等病理变化，与实验性自身免疫病、败血症、关节炎等人工构建动物模型的症状与病理特征高度相似，易导致研究人员对实验终点判断失误，造成实验数据不可重复，甚至使整个实验项目失败。

4、实验动物损失与设施污染：急性败血型的动物死淘率升高，造成实验动物资源的直接损失；同时，病菌可在笼具、垫料、饮水及空气中存活并传播，一旦屏障设施被污染，其彻底净化的成本极高，且会对后续实验动物的饲养与实验形成长期威胁。

PART 05诊断与处置

当猪群出现多发性浆膜炎、关节炎或急性死亡等疑似症状时，需立即将病猪隔离，防止疫情扩散。处置与诊断需遵循“先控病、后确诊”的原则，首先对整个猪群进行抗生素治疗，而非仅针对有临床症状的病猪，临床可选用青霉素类、头孢菌素类、庆大霉素、氟喹诺酮类药物。同时，及时采集病料进行实验室确诊，实验室诊断方法主要包括细菌分离培养与PCR检测，病料优先采集浆膜表面的渗出物、脑脊液及心脏血液，可有效减少杂菌污染，提升细菌分离培养的成功率。90%以上的菌株可通过间接血凝试验确定血清型。由于HPS是猪上呼吸道的常在菌，因此仅从鼻腔、咽喉等呼吸道部位采集的样本检出阳性无诊断价值，只有从血液、浆膜、脑脊液等全身性部位检出该菌，才可作为确诊依据。

鉴别诊断时，需将该菌与链球菌、巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪丹毒丝菌、猪霍乱沙门氏菌、大肠埃希菌等败血性细菌，以及支原体等病原进行区分，避免因误诊导致处置不当。

疫苗接种是控制副猪嗜血杆菌病的关键措施，母猪接种疫苗后，可通过母源抗体为4周龄以内的仔猪提供被动保护；仔猪在该阶段接种同一血清型的灭活疫苗，可在断奶后获得主动免疫保护。由于不同血清型的副猪嗜血杆菌菌株之间交叉保护率极低，因此建议采用当地流行菌株制备灭活苗，能更高效地控制本病的发生与流行。

PART 06生物安全控制与实验动物设施管理

HPS作为猪上呼吸道的常在菌，将其彻底清除出猪群的可行性极低。一方面，仔猪在1周龄前，鼻粘膜部位就可能定植该菌，仅通过早期断奶的方式难以实现根除；另一方面，即便HPS已被清除出现有猪群，由于猪群缺乏特异性免疫力，新引入的带菌猪或生产后期潜伏感染的猪只，仍可能引起疫情暴发。因此，对实验动物设施的HPS防控，需以“预防为主、综合防控”为核心，重点做好以下工作：

1、严格引种检疫：引种检疫不追求“无菌”，而是筛除HPS强毒力株、临床发病猪，并通过隔离、药物保健，对动物进行逐步驯化和统一免疫，避免强毒株引入导致急性败血症暴发。实验用猪的引种应优先选没有呼吸道症状、关节肿、神经症状和突然死亡史的健康稳定猪场，引种前可以了解该猪场是否有副猪暴发史，近期的细菌分离和药敏结果，副猪疫苗的使用情况等等。猪只入舍前需进行严格的隔离观察，结合临床检查开展健康评估，必要时取鼻拭子进行PCR检测或血清学筛查以排除强毒力株。

2、优化饲养管理，减少应激：严格控制养殖环境的温差，合理降低饲养密度，保证通风换气效果，减少各类应激；实行“全进全出”的饲养模式，猪群转出后，对栏舍、笼具进行彻底的清洗与消毒，可选用过硫酸氢钾、戊二醛、次氯酸钠等高效消毒剂交替使用，提升消毒效果。